嵌合抗原受體（CAR）自然殺傷細胞（CAR-NK細胞）是嵌合抗原受體T細胞（CAR-T 細胞）在免疫治療中的一種極-具潛力的替代方案。臨床試驗表明，為維持治療效果，需對患者進行高劑量、多頻次的CAR-NK細胞輸注，這就對CAR-NK細胞的規模化制備提出了高效、穩定的要求。本研究開發了一種創新的三步法策略，從人臍帶血CD34+造血干/祖細胞（CD34+ HSPCs）中高效制備誘導性NK細胞（iNK細胞）及CAR修飾的iNK細胞（CAR-iNK細胞）。單份臍帶血來源的CD34+ HSPCs經該方法處理后，可獲得1400萬至8300萬個成熟iNK細胞或700萬至3200萬個CAR-iNK細胞，這些細胞均高表達CD16分子及CAR受體，且未檢測到T細胞污染。無論是新鮮制備還是凍融后的iNK細胞與CAR-iNK細胞均對多種人類癌細胞表現出抗腫瘤活性，并能顯著延長荷瘤動物的生存期。該方法可實現CAR-NK細胞的高產量制備，且CAR改造過程成本更低，為這類細胞在癌癥患者治療中的廣泛應用提供了支持。

圖：從 CD34 + HSPC 生成 iNK 細胞和 CD19 CAR-iNK 細胞的三步策略

引用文獻

Fangxiao Hu, Jianhuan Li, Yao Wang, et al. Large-scale generation of iNK and CAR-iNK cells from CD34+ haematopoietic stem and progenitor cells for adoptive immunotherapy. Nature Biomedical Engineering. 2025 Oct 7.

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該項研究中，使用了欣博盛生物（NeoBioscience Technology Co, Ltd）的Human INF-γ、TNF-α、Perforin和Granzyme B ELISA試劑盒，用于檢測細胞培養上清液中的相關指標含量。